Ковальська В. Б. Флуоресцентні барвники для детекції білків різної просторової організації

English version

Дисертація на здобуття ступеня доктора наук

Державний реєстраційний номер

0512U000419

Здобувач

Спеціальність

  • 02.00.10 - Біоорганічна хімія

25-05-2012

Спеціалізована вчена рада

Д 26.220.01

Інститут біоорганічної хімії та нафтохімії ім. В.П. Кухаря Національної академії наук України

Анотація

Поліметинціаніни, cтирилціаніни, поліметининові халкони. Металокомплекси - фталоціаніни з позаплощинними лігандами. Альбуміни (людський, бичачий, кінський, яєчний), глобулярні білки - імуноглобулін G, бичача карбонангідраза (БКА), фібрилогенні білки альфа-синуклеїн, інсулін, бета-лактоглобулін, лізоцим в нативній формі та їх амілоїдні агрегати, олігомерний альфа-синуклеїн. Спектроскопія поглинання в УФ та видимому діапазонах, флуоресцентна спектроскопія, флуоресцентна поляризаційна спектроскопія, флуоресцентна спектроскопія з розділенням у часі, атомна силова мікроскопія, гель-електрофорез, комп'ютерне моделювання, замісне флуоресцентне титрування, хроматографія з мікрорідинною системою розділення, флуоресцентна спектроскопія при двофотонному збудженні, МАЛДІ-ТОФ мас спектрометрія. Показано, що моно- та триметинціаніни та гомодимерні стирилціаніни є ефективними зондами для визначення амілоїдних фібрил, а три- та пентаметинціаніни - для визначення олігомерних білкових агрегатів. Запропоновано просторову модель комплексу монометинового ціаніну з каналом зв'язування фібрили. Виявлено високу інгібіторну активність серії фталоціанінів з позаплощиними лігандами в реакції фібрилоутворення інсуліну. Показано специфічність сквараїнових барвників з довгими N-алкільними замісниками до альбумінів, та досліджено їх афінність до сайтів зв'язування людського сироваткового альбуміну. Показано можливість використання пентаметинових ціанінів для визначення глобулярних білків в нативній і частково денатурованих конформаціях та моніторингу конформаційних переходів. Розроблено та впроваджено в практику флуоресцентні зонди: для детекції амілоїдних фібрил та моніторингу процесу фібрилоутворення; для пост-електрофоретичної візуалізації білків в поліакриламідних гелях; для неспецифічного визначення білків в мікрорідинних системах аналізу. Сфера використання - біоорганічна хімія, молекулярна біологія

Файли

Схожі дисертації