Мельниченко С. В. Виділення та характеристика білкових чинників, що зв’язують інсулін в крові людей, хворих на цукровий діабет

Об’єкт дослідження: білкові чинники, що зв'язують інсулін в крові людей. Мета дослідження: Виділити і охарактеризувати чинники, що зв'язують інсулін в крові людей, та дослідити вміст найбільш важливого з них - антитіл до ендогенного (ІАА) та екзогенного (ІА) інсуліну в сироватках крові хворих на цукровий діабет (ЦД). Розробити метод гетерогенного твердофазного імуноферментного аналізу (ІФА) для виявлення ІА та ІАА і створити на його основі тест-систему "ІФА-АТ-інс". Методи дослідження та апаратура: афінна хроматографія, ІФА, радіоімунний аналіз, електрофорез в поліакриламідному гелі; ІФА - аналізатори “Multiskan EX” та "Stat Fax 3200", рідинний хроматограф "Bio Rad". Теоретичні і практичні результати: розроблено методичні підходи до виділення білкових чинників, здатних зв'язуватись з інсуліном в крові людей та встановлено, що використання поетапної афінної хроматографії може бути ефективним для визначення співвідношень інсулінзв'язуючих білків у крові хворих на ЦД, що дасть змогу диференційованопідходити до розуміння механізмів виникнення деяких випадків інсулінорезистентності. Новітність: показано, що при фракціонуванні сироваток крові здорових людей та хворих на ЦД методом поетапної афінної хроматографії виявляються аналогічні фракції інсулінзв'язуючих білків, які відрізняються кількісним вмістом білка; встановлено, що до їх складу, крім антитіл до інсуліну, входять також білки неімуноглобулінової природи; показано, що в однакових об'ємах сироваток крові хворих на ЦД і донорів міститься не тільки різна кількість усіх інсулінзв'язуючих білків, але й різна кількість білків імуноглобулінової природи. Ступінь упровадження: результати можуть бути використані в діагностиці і лікуванні хворих на ЦД та для прогнозування розвитку ЦД. Галузі використання: ендокринологія, клінічна та лабораторна діагностика.